Bolehkah penapis sel digunakan dalam penyediaan sampel sitometri aliran?

Cytometry aliran adalah teknik yang kuat yang digunakan dalam pelbagai bidang penyelidikan biologi, termasuk imunologi, penyelidikan kanser, dan biologi sel stem. Ia membolehkan analisis pesat dan menyusun sel berdasarkan ciri -ciri fizikal dan kimia mereka. Satu langkah penting dalam penyediaan sampel sitometri aliran adalah penyingkiran rumpun sel dan serpihan, yang boleh mengganggu analisis sel yang tepat. Di sinilah penapis sel dimainkan. Dalam catatan blog ini, kami akan meneroka sama ada penapis sel boleh digunakan dalam penyediaan sampel sitometri aliran dan bagaimana mereka dapat meningkatkan kualiti hasil sitometri aliran anda.

Kepentingan penyediaan sampel dalam sitometri aliran

Sebelum menyelidiki peranan penapis sel, penting untuk memahami mengapa penyediaan sampel yang betul adalah kritikal dalam sitometri aliran. Kualiti sampel anda secara langsung memberi kesan kepada ketepatan dan kebolehpercayaan data sitometri aliran anda. Rumpun sel dan serpihan boleh menyebabkan beberapa isu semasa analisis:

• Menyumbat cytometer aliran:Agregat sel besar atau serpihan boleh menyekat sel aliran cytometer, yang membawa kepada downtime instrumen dan kerosakan yang berpotensi.
• Isyarat positif palsu:Gumpalan sel boleh dikesan sebagai sel tunggal, mengakibatkan jumlah sel yang tidak tepat dan isyarat positif palsu.
• Resolusi yang dikurangkan:Serpihan dan agregat sel boleh mengganggu pemisahan populasi sel yang berbeza, mengurangkan resolusi data sitometri aliran anda.

Untuk mengatasi cabaran ini, sangat penting untuk memastikan sampel anda bebas daripada rumpun sel dan serpihan sebelum analisis. Di sinilah penapis sel boleh menjadi alat yang berharga.

Apa itu penapis sel?

Penapis sel adalah alat makmal yang direka untuk menapis penggantungan sel dan mengeluarkan rumpun sel, serpihan, dan zarah lain yang tidak diingini. Mereka biasanya terdiri daripada bingkai plastik dengan mesh atau penapis di bahagian bawah. Saiz mesh penapis menentukan saiz zarah yang boleh dilalui. Saiz mesh biasa untuk penapis sel termasuk 40μm, 70μm, dan 100μm.

• 40um sel penapis: Penapis mesh halus ini sesuai untuk mengeluarkan rumpun dan serpihan sel kecil, menjadikannya sesuai untuk aplikasi di mana analisis sel resolusi tinggi diperlukan.
• 70um sel penapis: Penapis mesh sederhana yang dapat menghilangkan agregat sel yang lebih besar sambil membolehkan kebanyakan sel tunggal melewati. Ia adalah penapis yang biasa digunakan dalam penyediaan sampel sitometri aliran.
• Penapis sel 100um: Penapis mesh kasar ini direka untuk menghilangkan rumpun sel dan serpihan yang besar, menjadikannya sesuai untuk penapisan sampel awal.

Menggunakan penapis sel dalam penyediaan sampel sitometri aliran

Penapis sel boleh dengan mudah dimasukkan ke dalam protokol penyediaan sampel cytometry aliran anda. Berikut adalah panduan langkah demi langkah mengenai cara menggunakan penapis sel dengan berkesan:

1. Pilih saiz mesh yang sesuai:Pilih penapis sel dengan saiz mesh yang sesuai untuk sampel anda. Jika sampel anda mengandungi agregat sel yang besar, mulakan dengan penapis 100μm untuk mengeluarkan rumpun terbesar. Kemudian, gunakan penapis 70μm atau 40μm untuk penapisan selanjutnya untuk mendapatkan penggantungan sel tunggal.
2. Sediakan penapis sel:Letakkan penapis sel dalam tiub atau plat koleksi yang sesuai. Pastikan penapis itu selamat duduk untuk mengelakkan kebocoran.
3. Pindahkan penggantungan sel:Berhati -hati pipet penggantungan sel ke bahagian atas penapis sel. Elakkan overfilling penapis, kerana ini boleh menyebabkan penyumbatan.
4. Tapis sampel:Perlahan ketuk bahagian penapis atau gunakan hujung pipet untuk membantu sel -sel melewati mesh. Anda juga boleh menggunakan picagari untuk menggunakan tekanan lembut jika perlu.
5. Kumpulkan sampel yang ditapis:Sebaik sahaja sampel telah melalui penapis, kumpulkan penggantungan sel yang ditapis dalam tiub koleksi atau plat.
6. Bilas penapis:Untuk memastikan semua sel dipulihkan, bilas penapis dengan sedikit penampan atau media dan kumpulkan bilas dalam tiub koleksi yang sama.

Faedah menggunakan penapis sel dalam sitometri aliran

Menggunakan penapis sel dalam penyediaan sampel sitometri aliran menawarkan beberapa faedah:

• Kualiti data yang lebih baik:Dengan mengeluarkan rumpun sel dan serpihan, penapis sel membantu meningkatkan ketepatan dan kebolehpercayaan data sitometri aliran anda. Ini menghasilkan jumlah sel yang lebih tepat, pemisahan populasi sel yang lebih baik, dan mengurangkan bunyi latar belakang.
• Downtime Instrumen Dikurangkan:Gumpalan sel dan serpihan boleh menyebabkan penyumbatan cytometer aliran, yang membawa kepada masalah downtime dan penyelenggaraan instrumen. Dengan menggunakan penapis sel untuk menapis sampel anda, anda boleh meminimumkan risiko menyumbat dan memastikan instrumen anda berjalan lancar.
• Daya tahan sel yang dipertingkatkan:Proses penapisan lembut penapis sel membantu mengekalkan daya maju sel, memastikan sel -sel anda tetap sihat dan berfungsi semasa analisis.
• Fleksibiliti:Penapis sel boleh digunakan dengan pelbagai jenis sel dan sumber sampel, menjadikannya alat serba boleh untuk penyediaan sampel sitometri aliran.

Pertimbangan semasa menggunakan penapis sel

Walaupun penapis sel adalah alat yang berharga untuk penyediaan sampel sitometri aliran, terdapat beberapa pertimbangan yang perlu diingat:

• Pilihan Saiz Mesh:Memilih saiz mesh yang sesuai adalah penting untuk memastikan anda mengeluarkan jumlah rumpun sel dan serpihan yang dikehendaki tanpa kehilangan terlalu banyak sel. Pertimbangkan saiz dan sifat sel anda apabila memilih saiz mesh.
• Kehilangan sel:Sesetengah sel boleh dikekalkan pada mesh penapis, mengakibatkan sedikit kehilangan sel. Untuk meminimumkan kehilangan sel, pastikan untuk membilas penapis dengan teliti dan gunakan teknik penapisan lembut.
• Kemandulan:Jika anda bekerja dengan sampel steril, penting untuk menggunakan penapis sel steril untuk mencegah pencemaran. Pastikan untuk mengendalikan penapis secara aseptik dan simpannya dalam persekitaran yang bersih.

Kesimpulan

Kesimpulannya, penapis sel adalah alat penting untuk penyediaan sampel sitometri aliran. Mereka membantu menghilangkan rumpun sel dan serpihan, meningkatkan kualiti data sitometri aliran anda dan mengurangkan risiko penyumbatan instrumen. Dengan memilih saiz mesh yang sesuai dan mengikuti teknik penapisan yang betul, anda dapat memastikan bahawa sampel anda bebas daripada zarah yang tidak diingini dan bersedia untuk analisis yang tepat.

Sebagai pembekal penapis sel terkemuka, kami menawarkan pelbagai jenis sel sel berkualiti tinggi dalam pelbagai saiz mesh untuk memenuhi keperluan khusus anda. Penapis sel kami dibuat daripada bahan premium dan direka untuk memberikan prestasi yang boleh dipercayai dan konsisten. Sama ada anda seorang penyelidik, saintis, atau juruteknik makmal, penapis sel kami dapat membantu anda mencapai hasil yang lebih baik dalam eksperimen sitometri aliran anda.

Jika anda berminat untuk mempelajari lebih lanjut mengenai penapis sel kami atau ingin membincangkan keperluan khusus anda, jangan ragu untuk menghubungi kami. Kami berada di sini untuk membantu anda mencari penyelesaian yang tepat untuk keperluan penyediaan sampel sitometri aliran anda.

Rujukan

1. Shapiro, HM (2003). Cytometry aliran praktikal (edisi ke -4). Wiley-liss.
2. Ormerod, mg (ed.). (2000). Cytometry aliran: Pendekatan praktikal (edisi ke -3). Oxford University Press.
3. Herzenberg, LA, Parks, D., Sahaf, B., Perez, O., Roederer, M., & Herzenberg, LA (2006). Sejarah dan masa depan aliran sitometri: pemandangan dari Stanford. Imunologi Klinikal dan Eksperimen, 144 (3), 337-347.