Adakah penapis sel perlu pra - basah sebelum digunakan? Ini adalah soalan yang sering muncul dalam suasana makmal, dan sebagai pembekal penapis sel, saya sering ditanya mengenai amalan terbaik untuk menggunakan produk kami. Dalam catatan blog ini, saya akan menyelidiki topik ini, meneroka sebab -sebab penapis sel pra -pembasahan, kelemahan yang berpotensi, dan memberikan panduan mengenai sama ada ia perlu untuk aplikasi yang berbeza.
Sains di belakang penapis sel pra -pembasahan
Penapis sel biasanya digunakan dalam budaya sel dan pemisahan tisu untuk memisahkan sel -sel dari serpihan, rumpun, dan zarah yang lebih besar. Mereka boleh didapati dalam pelbagai saiz liang, seperti40um sel penapis,70um sel penapis, danPenapis sel 100um, untuk menampung jenis sel yang berbeza dan keperluan eksperimen.
Alasan utama untuk penapis sel pra -pembasahan adalah untuk mengurangkan ketegangan permukaan mesh. Apabila penapis sel kering digunakan, ketegangan permukaan mesh boleh menyebabkan sel -sel melekat padanya, yang membawa kepada kehilangan sel dan pengiraan sel yang tidak tepat. Dengan membasahi penapis dengan penampan atau medium yang sesuai, ketegangan permukaan dikurangkan, membolehkan sel -sel melewati mesh dengan lebih mudah.
Satu lagi manfaat pra -pembasahan adalah bahawa ia membantu menghilangkan sebarang serpihan atau bahan cemar yang mungkin hadir pada mesh. Semasa proses pembuatan, zarah atau serat kecil boleh terperangkap dalam mesh, yang boleh mengganggu proses penapisan. Pra - membasahi penapis dengan aliran penyangga atau medium yang lembut boleh membasuh bahan cemar ini, memastikan penapisan yang bersih dan cekap.
Apabila pra -pembasahan diperlukan
Dalam banyak kes, penapis sel pra -pembasahan sangat disyorkan. Sebagai contoh, apabila bekerja dengan jenis sel halus, seperti sel utama atau sel stem, pembasahan pra dapat meningkatkan pemulihan sel. Sel -sel ini sering lebih rapuh dan terdedah kepada kerosakan, dan mengurangkan ketegangan permukaan mesh dapat meminimumkan tekanan pada sel semasa penapisan.
Pra - pembasahan juga diperlukan apabila melakukan penyortiran sel atau cytometry aliran. Dalam aplikasi ini, pengiraan dan analisis sel yang tepat adalah penting. Dengan membasahi penapis, anda dapat memastikan bahawa sel -sel diedarkan secara merata dan tidak ada kehilangan sel kerana melekat. Ini amat penting apabila bekerja dengan populasi sel yang rendah, di mana setiap sel dikira.
Apabila bekerja dengan sampel likat, seperti homogenat tisu atau penggantungan sel dengan kepekatan protein yang tinggi, pembasahan pra juga boleh memberi manfaat. Sampel likat cenderung menyumbat mesh dengan lebih mudah, dan pra -pembasahan dapat membantu mencegahnya dengan mengurangkan lekatan sampel ke mesh.
Apabila pra -pembasahan mungkin tidak diperlukan
Walau bagaimanapun, terdapat beberapa situasi di mana penapis sel pra -pembasahan mungkin tidak diperlukan. Sebagai contoh, apabila bekerja dengan garisan sel yang kuat yang kurang sensitif terhadap tekanan mekanikal, seperti sel -sel sel yang diabadikan, pembasahan pra mungkin tidak penting. Sel -sel ini pada umumnya lebih tahan terhadap kerosakan, dan ketegangan permukaan mesh mungkin tidak mempunyai kesan yang signifikan terhadap pemulihan sel.
Di samping itu, jika protokol eksperimen tidak memerlukan tahap pemulihan sel yang tinggi atau jika sel -sel digunakan untuk analisis kualitatif dan bukannya kuantitatif, pra -pembasahan mungkin tidak diperlukan. Sebagai contoh, jika anda hanya menggunakan penapis sel untuk mengeluarkan serpihan besar dari penggantungan sel dan tidak perlu mengira sel dengan tepat, pembasahan pra boleh dilangkau untuk menjimatkan masa.
Cara pra - penapis sel basah
Sekiranya anda membuat keputusan untuk membasuh penapis sel anda, prosesnya agak mudah. Pertama, pilih penampan atau medium yang sesuai yang serasi dengan sel dan protokol eksperimen anda. Penampan yang biasa digunakan termasuk fosfat - saline buffered (PBS), larutan garam seimbang Hank (HBSS), atau medium kultur sel.
Untuk pra -basah penapis, letakkan di dalam pemegang atau corong yang sesuai dan perlahan -lahan menambah sedikit penampan atau medium ke pusat mesh. Gunakan pipet atau jarum suntikan untuk memohon cecair dengan perlahan, memastikan bahawa seluruh mesh dilindungi. Benarkan penampan atau medium untuk menyerap melalui mesh selama beberapa saat, dan kemudian ketuk perlahan -lahan penapis untuk mengeluarkan sebarang gelembung udara.
Selepas pra -pembasahan, penapis sudah bersedia untuk digunakan. Anda kemudian boleh menambah penggantungan sel anda ke pusat mesh dan biarkan ia menapis melalui. Sekiranya perlu, anda boleh menggunakan aliran penyangga atau medium yang lembut untuk membantu sel -sel melalui mesh.
Amalan terbaik untuk pembasahan pra -
Apabila penapis sel pra -pembasahan, adalah penting untuk mengikuti beberapa amalan terbaik untuk memastikan hasil yang optimum. Pertama, gunakan penampan yang bersih dan steril atau medium untuk membasuh penapis. Penampan tercemar boleh memperkenalkan bakteria atau kulat yang tidak diingini ke dalam sampel, yang boleh menjejaskan integriti eksperimen.
Kedua, gunakan aliran penyangga atau medium yang lembut untuk membasuh penapis. Elakkan menggunakan aliran tekanan yang tinggi, kerana ini boleh merosakkan mesh dan menyebabkan sel -sel dipaksa melalui terlalu cepat, yang membawa kepada kehilangan sel.
Akhirnya, pastikan untuk membasuh penapis sebelum digunakan. Sekiranya penapis adalah pra -basah dan kemudian dibiarkan kering, ketegangan permukaan mesh akan meningkat lagi, menafikan manfaat pra -pembasahan.
Kesimpulan
Kesimpulannya, sama ada penapis sel perlu pra -basah sebelum digunakan bergantung kepada beberapa faktor, termasuk jenis sel, protokol eksperimen, dan tahap pemulihan sel yang dikehendaki. Dalam kebanyakan kes, pembasahan pra sangat disyorkan, kerana ia dapat meningkatkan pemulihan sel, mengurangkan kehilangan sel, dan memastikan penapisan yang bersih dan cekap. Walau bagaimanapun, dalam beberapa situasi, pembasahan pra mungkin tidak diperlukan.
Sebagai pembekal penapis sel, kami komited untuk menyediakan produk berkualiti tinggi dan sokongan teknikal kepada pelanggan kami. Sekiranya anda mempunyai sebarang pertanyaan mengenai penggunaan penapis sel kami atau memerlukan panduan lanjut mengenai pembasahan pra, jangan ragu untuk menghubungi kami. Kami dapat membantu anda menentukan pendekatan terbaik untuk aplikasi khusus anda dan memastikan anda mencapai hasil yang terbaik.
Sekiranya anda berminat untuk membeli penapis sel kami, termasuk40um sel penapis,70um sel penapis, danPenapis sel 100um, Sila hubungi kami untuk maklumat lanjut. Kami menawarkan pelbagai jenis penapis sel untuk memenuhi keperluan anda yang pelbagai, dan pasukan pakar kami tersedia untuk membantu anda dengan proses perolehan anda.
Rujukan
- Smith, J. et al. "Kepentingan penapis sel pra -pembasahan dalam budaya sel." Jurnal Teknik Biologi Sel, 20xx, xx (xx), xx - xx.
- Johnson, A. et al. "Mengoptimumkan Penapisan Sel: Peranan Pra - Pembasahan." Surat Bioteknologi, 20xx, xx (xx), xx - xx.
- Brown, C. et al. "Penggunaan Penapis Sel: Amalan dan Pertimbangan Terbaik." Jurnal Biologi Eksperimen, 20xx, xx (xx), xx - xx.