Hei ada! Sebagai pembekal plat TLC, saya sering bertanya tentang cara terbaik untuk menggunakan kapilari untuk aplikasi sampel plat TLC. Ia mungkin kelihatan seperti sebahagian kecil daripada proses kromatografi lapisan nipis (TLC), tetapi ia sebenarnya sangat penting untuk mendapatkan hasil yang tepat dan boleh dipercayai. Oleh itu, mari kita menyelam dan bercakap tentang bagaimana anda boleh menggunakan kapilari untuk aplikasi sampel plat TLC seperti pro.
Mula -mula, mari kita faham apa kapilari dan mengapa ia begitu penting untuk TLC. Kapilari adalah tiub kecil, biasanya diperbuat daripada kaca. Ia bagus untuk TLC kerana ia boleh mengambil hanya jumlah sampel yang betul dan menyampaikannya dengan tepat ke plat TLC. Ketepatan ini adalah kunci kerana ia mempengaruhi seberapa baik komponen yang berbeza dalam sampel anda berasingan semasa proses kromatografi.
Menyediakan bahan anda
Sebelum anda mula menggunakan kapilari, anda perlu mengumpulkan semua bahan yang diperlukan. Sudah tentu, anda memerlukan plat TLC anda. Kami menawarkan kedua -duanyaPlat TLC kacadanPlat TLC aluminium. Plat kaca lebih tegar dan dapat menahan suhu yang lebih tinggi, manakala plat aluminium lebih fleksibel dan ringan. Pilih yang sesuai dengan keperluan khusus anda.
Anda juga memerlukan sampel anda. Pastikan ia dalam pelarut yang sesuai. Pelarut harus cukup menatap untuk menguap dengan cepat dari plat TLC, tetapi ia juga perlu membubarkan sampel anda dengan baik. Pelarut yang biasa untuk banyak sampel adalah campuran pelarut organik seperti metanol dan kloroform, tetapi pilihannya benar -benar bergantung kepada sifat sampel anda.
Dan tentu saja, anda memerlukan kapilari. Terdapat pelbagai jenis kapilari yang ada, tetapi untuk kebanyakan aplikasi TLC, kapilari kaca mudah dengan hujung halus cukup. Anda boleh mencari ini di kebanyakan kedai bekalan saintifik.
Memuatkan kapilari
Sekarang, mari kita bincangkan bagaimana memuat kapilari dengan sampel anda. Pertama, pastikan sampel anda baik - bercampur. Anda tidak mahu apa -apa zarah menetap di bahagian bawah, kerana ini boleh membawa kepada hasil yang tidak konsisten. Sapukan hujung kapilari ke dalam larutan sampel. Cecair akan dimasukkan ke dalam kapilari dengan tindakan kapilari (oleh itu nama!). Anda tidak perlu membuat banyak sampel. Hanya lajur kecil cecair dalam kapilari sudah cukup.
Berhati -hati untuk tidak menyentuh hujung kapilari ke bahagian bawah atau sisi bekas yang memegang sampel. Ini boleh mencemarkan kapilari dan menjejaskan keputusan anda. Juga, jika anda menggunakan sampel komponen berbilang, pastikan anda mencampurkannya dengan teliti sebelum setiap pemuatan untuk memastikan semua komponen hadir dalam perkadaran yang betul dalam kapilari.
Memohon sampel ke plat TLC
Sebaik sahaja anda memuat kapilari, sudah tiba masanya untuk memohon sampel ke plat TLC. Pertama, tandakan baris permulaan pada plat TLC. Ini biasanya kira -kira 1 - 2 cm dari bahagian bawah plat. Anda boleh menggunakan pensil untuk menandakannya, kerana dakwat boleh mengganggu proses kromatografi.
Pegang kapilari berserenjang ke plat TLC dan perlahan -lahan menyentuh hujung kapilari ke garisan permulaan yang ditandakan. Sampel akan dipindahkan ke plat. Cuba simpan tempat sekecil mungkin. Tempat yang kecil memberikan pemisahan komponen yang lebih baik dalam sampel anda. Sekiranya tempat terlalu besar, komponen mungkin bertindih semasa proses kromatografi, menjadikannya sukar untuk menganalisis hasilnya.
Anda mungkin perlu memohon sampel dalam pelbagai aliquot kecil untuk membina kepekatan. Selepas setiap permohonan, biarkan pelarut menguap sepenuhnya sebelum menggunakan aliquot seterusnya. Anda boleh menggunakan aliran udara yang lembut atau pengering rambut pada tetapan yang rendah dan sejuk untuk mempercepatkan proses penyejatan. Hanya pastikan anda tidak meniup sampel dari pinggan!
Petua untuk aplikasi yang berjaya
Berikut adalah beberapa petua tambahan untuk membuat aplikasi sampel anda menggunakan kapilari yang berjaya.
- Pastikan ia bersih: Sentiasa mengendalikan kapilari dan plat TLC dengan tangan atau sarung tangan yang bersih. Pencemaran dari minyak, kotoran, atau bahan lain di tangan anda boleh menjejaskan hasil kromatografi anda.
- Amalan menjadikan sempurna: Jika anda baru menggunakan kapilari untuk aplikasi sampel TLC, ia mungkin mengambil beberapa usaha untuk mendapatkannya. Berlatih pada plat TLC ganti dengan sampel yang mudah sehingga anda merasa yakin.
- Mengawal kelajuan: Apabila memohon sampel, cuba gunakannya pada kelajuan yang konsisten. Permohonan yang perlahan dan mantap membantu mengekalkan tempat yang kecil dan baik - ditakrifkan.
- Elakkan lebih - Memuat: Lebih baik mempunyai kepekatan sampel yang lebih rendah dan memohon beberapa kali daripada ke atas - memuat kapilari dan memohon sejumlah besar sampel sekaligus. Lebih - pemuatan boleh menyebabkan pemisahan yang lemah dan melekat pada plat TLC.
Penyelesaian masalah
Kadang -kadang, perkara tidak berjalan seperti yang dirancang. Berikut adalah beberapa masalah biasa yang mungkin anda hadapi apabila menggunakan kapilari untuk aplikasi sampel TLC dan bagaimana untuk memperbaikinya.
- Bintik besar atau tidak teratur: Jika tempat anda terlalu besar atau tidak teratur, ia mungkin kerana anda menggunakan sampel terlalu cepat atau dengan tekanan yang terlalu banyak. Cuba gunakan sampel dengan lebih perlahan dan perlahan, dan pastikan hujung kapilari berserenjang dengan plat.
- Tiada pemindahan sampel: Jika sampel tidak memindahkan dari kapilari ke plat, ia mungkin kerana hujung kapilari disekat. Anda boleh mencuba perlahan -lahan mengetuk kapilari di pinggir bekas untuk menghilangkan sebarang penyumbatan. Jika itu tidak berfungsi, anda mungkin perlu menggunakan kapilari baru.
- Streaking: Streaking pada plat TLC boleh disebabkan oleh lebih banyak - memuat sampel atau menggunakan pelarut yang tidak membubarkan sampel dengan baik. Cuba mengurangkan jumlah sampel yang anda gunakan dan pastikan pelarut anda sesuai untuk sampel anda.
Kesimpulan
Menggunakan kapilari untuk aplikasi sampel plat TLC adalah kemahiran penting dalam kromatografi lapisan nipis. Dengan mengikuti langkah -langkah yang telah digariskan di atas, anda dapat memastikan bahawa sampel anda digunakan dengan tepat dan konsisten, yang membawa kepada pemisahan yang lebih baik dan hasil yang lebih dipercayai.
Sekiranya anda berada di pasaran untuk plat TLC berkualiti tinggi, sama adaPlat TLC kacaatauPlat TLC aluminium, Kami telah mendapat anda dilindungi. Kami komited untuk menyediakan produk dan sokongan terbaik untuk membantu anda mencapai hasil yang hebat dalam kerja kromatografi anda. Jika anda mempunyai sebarang pertanyaan atau berminat untuk membeli plat TLC kami, jangan teragak -agak untuk menjangkau perbincangan perolehan.
Rujukan
- Snyder, LR, Kirkland, JJ, & Glajch, JL (2010). Pembangunan kaedah HPLC praktikal. Wiley.
- McMaster, MC (2010). HPLC untuk saintis farmaseutikal. Wiley - Interscience.