Hei ada, peminat sel! Sebagai pembekal penapis sel atas, saya telah melihat secara langsung pentingnya memuatkan penggantungan sel ke penapis sel dengan betul. Ia bukan sekadar mencurahkan mudah - dan - pergi proses; Ia boleh memberi kesan yang ketara kepada kualiti pemisahan sel dan aplikasi hiliran anda. Oleh itu, mari kita menyelam cara yang disyorkan untuk memuatkan penggantungan sel ke penapis sel.
Mengapa perkara memuatkan yang betul
Sebelum kita masuk ke dalam bagaimana, mari kita bincangkan mengapa penting untuk memuatkan penggantungan sel anda dengan betul. Penapis sel direka untuk memisahkan sel -sel dari serpihan, rumpun, dan zarah yang tidak diingini. Jika anda memuatkan penggantungan dengan tidak betul, anda mungkin berakhir dengan penyumbatan, pemisahan yang tidak cekap, atau merosakkan sel berharga anda. Ini boleh membawa kepada keputusan eksperimen yang tidak tepat, masa yang sia -sia, dan sumber.
Menyediakan bahan anda
Perkara pertama yang pertama, kumpulkan semua bahan yang anda perlukan. Anda pasti memerlukan penapis sel. Kami menawarkan pelbagai pilihan, sepertiPenapis sel 100um,40um sel penapis, dan70um sel penapis. Pilih yang sesuai dengan jenis sel khusus anda dan saiz zarah yang anda mahu menapis.
Anda juga memerlukan tiub koleksi untuk menangkap penggantungan sel yang ditapis. Pastikan ia bersih dan steril. Dan tentu saja, penggantungan sel anda. Ia harus baik - dicampur sebelum memuatkan untuk memastikan pengedaran sel sel.
Langkah - oleh - proses pemuatan langkah
Langkah 1: Kumpulkan persediaan
Letakkan penapis sel di atas tiub koleksi. Pastikan ia sesuai untuk mengelakkan sebarang kebocoran. Anda boleh menggunakan forsep steril untuk mengendalikan penapis jika diperlukan, tetapi lembut untuk mengelakkan merosakkan mesh.
Langkah 2: Periksa penggantungan sel
Berikan penggantungan sel anda pusaran atau pipet yang baik ke atas dan ke bawah beberapa kali untuk memecahkan sebarang rumpun kecil. Jika anda melihat rumpun besar yang tidak akan terputus, anda mungkin mahu pra - penapis penggantungan melalui penapis liang yang lebih besar terlebih dahulu.
Langkah 3: Memuatkan penggantungan
Sekarang, sudah tiba masanya untuk memuatkan penggantungan sel ke penapis. Anda boleh menggunakan pipet atau picagari tanpa jarum. Perlahan dan mantap, tambahkan penggantungan ke pusat penapis. Elakkan mencurahkannya terlalu cepat atau dari ketinggian yang terlalu tinggi, kerana ini boleh menyebabkan percikan dan pengedaran tidak sekata penggantungan pada mesh.
Jika anda menggunakan pipet, mulakan dengan aliquot kecil dan biarkan setiap penapis aliquot melalui sebelum menambah lebih banyak. Ini membantu mengelakkan beban penapis dan mengurangkan risiko penyumbatan. Untuk jumlah yang lebih besar, jarum suntikan boleh menjadi pilihan yang lebih cekap. Hanya pastikan untuk mengawal kadar aliran untuk mengelakkan tekanan terlalu banyak pada penapis.
Langkah 4: Membilas
Sebaik sahaja anda telah menambah semua penggantungan sel, adalah idea yang baik untuk membilas penapis dengan sedikit penampan atau media. Ini membantu membasuh mana -mana sel yang tersisa melalui penapis dan meningkatkan hasil keseluruhan sel yang ditapis. Perlahan -lahan pipet larutan bilas di sekeliling tepi penapis dan biarkan ia menapis.
Langkah 5: Pengadukan lembut
Dalam sesetengah kes, pergolakan lembut dapat membantu memperbaiki proses penapisan. Anda dengan lembut boleh mengetuk sisi penapis atau tiub koleksi untuk menggalakkan sel -sel untuk melalui mesh. Tetapi berhati -hati untuk tidak terlalu kasar, kerana ini boleh merosakkan sel -sel.
Penyelesaian masalah
Kadang -kadang, perkara tidak berjalan lancar seperti yang dirancang. Berikut adalah beberapa isu biasa dan bagaimana untuk memperbaikinya:
Tersumbat
Jika penapis mula menyumbat, berhenti menambah lebih banyak penggantungan dengan segera. Anda boleh mencuba perlahan -lahan berputar penapis atau menggunakan pipet untuk memecahkan penyumbat. Jika itu tidak berfungsi, anda mungkin perlu beralih ke penapis baru.
Hasil yang rendah
Sekiranya anda mendapat hasil yang rendah sel -sel yang ditapis, periksa sama ada penapis tersumbat. Anda juga boleh cuba meningkatkan jumlah bilas atau mengulangi langkah bilas. Pastikan anda mengendalikan sel -sel perlahan sepanjang proses untuk mengelakkan kehilangan sel.
Pencemaran
Untuk mengelakkan pencemaran, sentiasa bekerja dalam persekitaran yang steril. Pakai sarung tangan dan gunakan bahan steril. Jika anda mengesyaki pencemaran, buang sampel dan mulakan semula.
Petua untuk hasil yang optimum
- Pilih saiz liang yang betul: Seperti yang dinyatakan sebelum ini, memilih saiz liang yang sesuai adalah penting. Saiz liang yang lebih kecil adalah lebih baik untuk mengeluarkan zarah yang lebih kecil, tetapi mereka juga boleh menyumbat lebih mudah. Saiz liang yang lebih besar lebih cepat tetapi mungkin tidak menyaring semua serpihan.
- Pastikan ia sejuk: Jika sel anda sensitif terhadap suhu, simpan penggantungan sel dan tiub pengumpulan pada ais sepanjang proses. Ini membantu mengekalkan daya maju sel.
- Catat hasil anda: Jejak jumlah penggantungan sel, jumlah larutan bilas yang digunakan, dan hasil sel yang ditapis. Maklumat ini berguna untuk eksperimen masa depan dan penyelesaian masalah.
Kesimpulan
Memuatkan penggantungan sel ke penapis sel adalah langkah yang mudah namun kritikal dalam banyak eksperimen berasaskan sel. Dengan mengikuti langkah -langkah dan petua yang disyorkan yang saya kongsi, anda boleh memastikan pemisahan sel yang cekap dan tinggi. Sama ada anda bekerja dengan aPenapis sel 100um,40um sel penapis, atau70um sel penapis, pemuatan yang betul akan membantu anda memanfaatkan sepenuhnya sampel sel anda.
Sekiranya anda berada di pasaran untuk penapis sel berkualiti tinggi atau mempunyai sebarang soalan mengenai proses pemuatan, jangan ragu untuk menjangkau. Kami di sini untuk membantu anda dengan semua keperluan sel anda. Hubungi kami untuk memulakan perbincangan perolehan dan cari penyelesaian terbaik untuk penyelidikan anda.
Rujukan
- Freshney, RI (2010). Budaya sel haiwan: manual teknik asas dan aplikasi khusus. Wiley - Blackwell.
- Pollard, TD, & Earnshaw, WC (2008). Biologi sel. Saunders.